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孔雀石綠檢測試劑盒

孔雀石綠檢測試劑盒

產(chǎn)品型號:

所屬分類:獸 藥 殘 留 ,激素類ELISA快速檢測試劑盒

產(chǎn)品時(shí)間:2024-08-18

簡要描述:孔雀石綠檢測試劑盒可檢樣本:水產(chǎn)(魚蝦)、水樣在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原,樣本中的殘留物孔雀石綠將和 微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭抗孔雀石綠抗體, 加入酶標(biāo)記物后,用 TMB 底物顯色,樣本吸光值 與其所含殘留物孔雀石綠的含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出相應(yīng)殘留物孔雀石綠的含量。

詳細(xì)說明:

類(elisa試劑盒)

 

產(chǎn)品名稱

包裝規(guī)格

靈敏度

可檢樣本

笨乙醇胺A檢測試劑盒(新產(chǎn)品)

96

0.25ppb

肉、飼料、尿液

可樂啶快速檢測試劑盒(新產(chǎn)品)

96

0.05ppb

肉、飼料、尿液、血清

賽庚啶快速檢測試劑盒(新產(chǎn)品)

96孔

0.05ppb

肉、飼料、尿液、血清

呋喃唑酮代謝物(AOZ)快速檢測試劑盒

96孔

0.02 ppb

組織、蜂蜜、水產(chǎn)

呋喃它酮代謝物(AMOZ)快速檢測試劑盒

96孔

0.1 ppb

水產(chǎn)(魚蝦)、蜂蜜、雞肉、雞肝, 奶樣

呋喃妥因代謝物(AHD)快速檢測試劑盒

96孔

0.05 ppb

水產(chǎn)(魚蝦)、蜂蜜、雞肉、雞肝、奶樣

呋喃西林代謝物(SEM)快速檢測試劑盒

96孔

0.1 ppb

水產(chǎn)(魚蝦)、蜂蜜、雞肉、雞肝, 奶樣

新霉素(Neomycin)快速檢測試劑盒

96孔

0.5ppb

豬肉/肝、雞鴨肉/肝           蝦魚、蜂蜜

四環(huán)素類(TC)快速檢測試劑盒

96孔

0.05 ppb

雞肉/鴨肉、豬肉/豬肝、水產(chǎn)、蜂蜜

氯霉素(CAP)快速檢測試劑盒

96孔

0.05 ppb

動物組織、水產(chǎn)、蜂蜜、腸衣、尿液、雞蛋、牛奶、血清  

氟苯尼考 (FF)快速檢測試劑盒

96孔

0.5 ppb

動物組織、水產(chǎn)、蜂蜜、腸衣、尿液、雞蛋、牛奶、血清  

克倫特羅檢(CLE) 快速測試劑盒

96

0.1ppb

豬肉、豬肝、 血清            飼料、豬尿

萊克多巴胺(RACT)檢測試劑盒

96孔

0.1/0.03ppb

尿液

沙丁胺醇(Salbutamal)快速檢測試劑盒

96孔

0.5 ppb

肉類、肝臟、尿液、配合料、濃縮料、預(yù)混料

β-興奮ji快速檢測試劑盒

96

0.1 ppb

尿樣、血清、組織、飼料

喹諾酮類藥物(QNS)快速檢測試劑盒

96

1 ppb

組織、蝦魚、血清、蜂蜜

恩諾沙星(EN)快速檢測試劑盒

96

0.25 ppb

組織、蝦魚、血清、蜂蜜

氨芐青霉素(AM)快速檢測試劑盒

96

0.1 ppb

豬肉/肝、雞鴨肉/肝           蝦魚、蜂蜜、牛奶

青霉素G(BP)快速檢測試劑盒

96

0.05 ppb

豬肉/肝、雞鴨肉/肝           蝦魚、蜂蜜、牛奶

泰樂菌素(TYL)快速檢測試劑盒

96

1.5 ppb

肌肉、肝臟、蜂蜜

鏈霉素(Str)快速檢測試劑盒

96

0.5 ppb

肌肉、水產(chǎn)、肝臟、蜂蜜、牛奶

鏈霉素(Str)快速檢測試劑盒

96

0.1 ppb

肌肉、水產(chǎn)、肝臟、蜂蜜、牛奶

喹乙醇(olaquindox)快速檢測試劑盒

96

1ppb

組織、飼料

安定(Dia)快速檢測試劑盒

96

0.1 ppb

豬肉/肝、雞肉/肝 、飼料、尿液

己烯雌酚(DES)快速檢測試劑盒

96

0.1 ppb

雞肉、雞肝、飼料、尿液 、水產(chǎn)(魚蝦)

慶大霉素(Gen)快速檢測試劑盒

96

0.1 ppb

雞肉、雞肝、血清

三聚氰胺(Melamine)快速檢測試劑盒

96

1ppb

牛奶、組織、蛋類、飼料

孔雀石綠檢測試劑盒

96

0.025 ppb

水產(chǎn)(魚蝦)、水樣

磺胺多殘留快速檢測試劑盒

96

0.4 ppb

雞肉/肝、豬肉/肝、蜂蜜 、雞蛋、血清、尿液、牛奶

磺胺二甲基嘧啶(SM2)快速檢測試劑盒

96

1 ppb

雞肉/肝、豬肉/肝、蜂蜜 、雞蛋、血清、尿液、牛奶

磺胺對甲氧嘧啶(SMD)快速檢測試劑盒

96

0.4 ppb

雞肉/肝、豬肉/肝、蜂蜜 、雞蛋、血清、尿液、牛奶

磺胺甲噁唑(SMZ)快速檢測試劑盒

96

0.4 ppb

雞肉/肝、豬肉/肝、蜂蜜 、雞蛋、血清、尿液、牛奶

磺胺類三殘留快速檢測試劑盒

96

1 ppb

雞肉/肝、豬肉/肝、蜂蜜 、雞蛋、血清、尿液、牛奶

磺胺喹噁啉(SQX)快速檢測試劑盒

96

1 ppb

雞肉/肝、豬肉/肝、蜂蜜 、雞蛋、血清、尿液、牛奶

 

 

 

 

EF02103 2014-01

 

孔雀石綠快速檢測試劑盒說明書

 

一、原理

本試劑盒采用間接競爭 ELISA 方法,在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原,樣本中的殘留物孔雀石綠將和 微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭抗孔雀石綠抗體, 加入酶標(biāo)記物后,用 TMB 底物顯色,樣本吸光值 與其所含殘留物孔雀石綠的含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出相應(yīng)殘留物孔雀石綠的含量。

二、試劑盒特性

試劑盒靈敏度:  0.05ppb

孵育溫度:    25

孵育時(shí)間:    30min30min15min

樣本檢測限

 

水樣 ——————  0.1ppb

 

水產(chǎn)品 —————— 0.5ppb

 

  • 交叉反應(yīng)率

 

顯性孔雀石綠 ————————

100%

隱性孔雀石綠 ————————

0.1%

結(jié) 晶 紫

——————————

95%

隱性結(jié)晶紫

——————————

0.1%

 

  • 樣本回收率

 

水樣、水產(chǎn)品 ————————  80%~110%

精密度

板內(nèi)、板間變異系數(shù)≤12%

三、試劑盒組成

 

1

微量測試孔

每條 8 孔,一板 12 條

 

 

 

 

 

10 倍濃縮標(biāo)準(zhǔn)液

0ppb

0.5ppb

 

×6 瓶

 

 

2

1.5ppb

4.5ppb

 

 

 

 

 

1ml/瓶、黑色帽) 13.5ppb

40.5ppb

3

酶標(biāo)記物

12ml

紅色帽

 

 

 

 

4

抗體工作液

7ml

藍(lán)色帽

 

 

 

 

 

5

底物 A 液

7ml

白色帽

 

 

 

 

6

底物 B 液

7ml

黑色帽

 

 

 

 

7

終止液

7ml

黃色帽

 

 

 

 

8

20X 濃縮洗滌液

40ml

白色帽

 

 

 

 

9

氧化劑

3ml

黑色帽

 

 

 

 

10

4X 濃縮復(fù)溶液

50ml

透明帽

 

 

 

 

 

四、所用儀器、試劑

具備的儀器:酶標(biāo)儀、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、 刻度移液管、天平(感量 0.01g)、氮 吹儀、恒溫箱

微量移液器:單道 20200µl、單道 1001000µl、

多道 30300 µl

劑:乙腈、二氯甲烷、無水硫酸鈉、正己

 

五、樣本前處理步驟

樣本處理前須知

a)實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,吸取不同試 劑時(shí)要更換吸頭。

b)實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈, 必要時(shí)可對實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行清潔,以避免污染干擾實(shí) 驗(yàn)結(jié)果。

樣本前處理需配制: 配液 1 樣品提取液

乙腈-二氯甲烷混合溶液:

V 乙腈-V 二氯甲烷 = 4 : 1 40ml 乙腈, 再加入 10ml 二氯甲烷,混勻后使用。

配液 2 樣品復(fù)溶液

4X 濃縮復(fù)溶液用去離子水按 13 稀釋 (1 份 4×濃縮復(fù)溶液+3 份去離子水),或按所需用 量配制。

樣本處理:

a)水樣處理方法

50µl 清澈水樣樣直接測定(如果水樣渾濁 一定要過濾或 4000r/min 離心 10min,直至得到 清澈樣),暫不使用的樣本應(yīng)冷凍保存。

樣本稀釋倍數(shù):  1 倍

b)水產(chǎn)品處理方法

1、稱取 2±0.05g 均質(zhì)組織樣品于 50ml 離心管中, 加入 6ml 樣品提取液(配液 1),2g 無水硫酸 鈉,振蕩 5min ,室溫(25℃左右)4000r/min以上離心 10min;

2、取 3ml 上清液,加入 20µl 氧化劑,搖勻,在 56 條件下氮?dú)饣蚩諝饬鞔抵?干燥;

3、加入 1ml 正己烷,加入 1ml 樣品復(fù)溶液(配液

2),振蕩搖勻 1min,4000r/min 以上離心 5min

4、取下層 50 µl 用于分析;

樣本稀釋倍數(shù):  1 倍

注:此方法所得到的結(jié)果為孔雀石綠;隱性孔 雀石綠;結(jié)晶紫;隱性結(jié)晶紫的總量。

六、酶標(biāo)免疫分析程序:

測定前應(yīng)須知:

1、 使用前將需用試劑和板條的溫度回升至室溫 2025℃)。

2、 使用之后立即將所有試劑放回 28℃。

3、 在 ELISA 分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于 洗板的*性,正確的洗板操作是 ELISA 測定 程序中的要點(diǎn)。

4、 所有恒溫孵育過程,避免光線照射,用蓋板膜 蓋住微孔板。

操作步驟:

1、從 28℃冷藏環(huán)境中取出所需試劑,室溫(20 25℃)平衡 30min 以上,注意每種液體試劑使 用前均須搖勻。

2、取出框架及需要數(shù)量的微孔,將不用的微孔放 入自封袋,保存于 2-8℃。

3、配液 1:將 40ml 濃縮洗滌液(20 倍濃縮)用去 離子水按照 119 稀釋(1 份濃縮洗滌液+19 份 去離子水),或按所需用量配制洗滌液。

配液 2

配制孔雀石綠標(biāo)準(zhǔn)液:取一定量的 10 倍濃縮

標(biāo)準(zhǔn)液用樣品復(fù)溶液 10 倍稀釋,現(xiàn)配現(xiàn)用, 具體如下:

標(biāo)準(zhǔn)液6配制4.05ppb 標(biāo)準(zhǔn)液--50ul 40.5ppb

標(biāo)準(zhǔn)液加 450ul 樣品復(fù)溶液混勻;

標(biāo)準(zhǔn)液5配制1.35ppb 標(biāo)準(zhǔn)液--50ul 13.5ppb

標(biāo)準(zhǔn)液加 450ul 樣品復(fù)溶液混勻;

標(biāo)準(zhǔn)液 4配制 0.45ppb 標(biāo)準(zhǔn)液-- 50ul 4.5ppb

標(biāo)準(zhǔn)液加 450ul 樣品復(fù)溶液混勻;

標(biāo)準(zhǔn)液 3配制 0.15ppb 標(biāo)準(zhǔn)液-- 50ul 1.5ppb

標(biāo)準(zhǔn)液加 450ul 樣品復(fù)溶液混勻;

標(biāo)準(zhǔn)液 2配制 0.05ppb 標(biāo)準(zhǔn)液-- 50ul 0.5ppb

標(biāo)準(zhǔn)液加 450ul 樣品復(fù)溶液混勻;

標(biāo)準(zhǔn)液 1配制 0ppb 標(biāo)準(zhǔn)液-- 50ul 0ppb 標(biāo)

準(zhǔn)液加 450ul 樣品復(fù)溶液混勻;

4、編號:將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號,每 個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做 2 孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和 樣本孔所在的位置。

5、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本 50µl/孔到各自的微孔中,然后加 入抗體工作液 50µl/孔,用蓋板膜封板,輕輕振 蕩混勻。25℃環(huán)境中反應(yīng) 30min。

6、將孔內(nèi)液體甩干,用已稀釋的洗滌液 250µl/ 洗板 45 次,每次間隔 1530 秒,用吸水紙 拍干(拍干后未清除的氣泡可用干凈的槍頭刺 破)。

7、每孔加入酶標(biāo)記物 100µl,蓋板膜蓋板后置25 環(huán)境中反應(yīng) 30min。將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌 液充分洗,45 遍(同上),用吸水紙拍干(拍 干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。

8、顯色:加入底物 A  50µl/孔,再加入底物 B 50µl/孔,輕輕振蕩混勻,25℃環(huán)境中避光顯 15min。

9、測定:加入終止液 50µl/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè) 定酶標(biāo)儀于 450nm 處(建議用雙波長 450/630n m 檢測,5min 內(nèi)讀數(shù)),測定每孔 OD 值。

七、結(jié)果判定

結(jié)果判定有兩種方法,粗略判定可用第 1 種方 法,定量判定用第 2 種方法。注意樣本吸光度值與 其所含孔雀石綠量成負(fù)相關(guān)。

1、粗略判定:

用樣本的平均吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)值比較即可得出 其濃度范圍(ng/ml)。假設(shè)樣本 1 的吸光度值為 0.3, 樣本 2 的吸光度值為 1.0,標(biāo)準(zhǔn)液吸光度值分別是:

0ppb  2.243;0.05ppb  1.816;0.15ppb  1.415 變質(zhì)。

0.45ppb  0.741.35ppb  0.313;4.05ppb  0.155  8、該試劑盒zui佳反應(yīng)溫度為 25℃,溫度過高或過

則樣本 1 的濃度范圍是 1.35ppb4.05ppb;樣本 2

的濃度范圍是 0.15ppb0.45ppb,乘以其對應(yīng)的 釋倍數(shù)即為樣本中孔雀石綠實(shí)際濃度。

2、定量分析

1)百分吸光率的計(jì)算,標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分 吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的吸光度值的平均值(雙 孔)除以*個(gè)標(biāo)準(zhǔn)(0 標(biāo)準(zhǔn))的吸光度值,再乘 以 100%,即

 

B

百分吸光率(%)= ×100% B0

低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

 

九、儲藏條件和保質(zhì)期

 

1、儲藏條件:試劑盒于 2-8℃保存,不要冷凍。 2、保 質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為 1 年,生產(chǎn)日期見

包裝盒。

提示:酶標(biāo)板真空包裝袋若有漏氣,酶標(biāo)板仍然正 常有效,不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,請放心使用。

 

B—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值 B0—0ng/ml 標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值

2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算 以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo),以孔雀石綠標(biāo)準(zhǔn)品濃度(ng/ml)的半對數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲 線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo) 準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對應(yīng)的濃度,乘以其對應(yīng)的 釋倍數(shù)即為樣本中孔雀石綠實(shí)際濃度。若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算,更便于 大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。

八、 注意事項(xiàng)

1、室溫低于 25℃或試劑及標(biāo)本未回到室溫(2025℃)會導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的 OD 值偏低。

2、在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會 伴隨著標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。 所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

3、混合要均勻,否則會出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象。

4、反應(yīng)終止液為 2M 硫酸,避免接觸皮膚。

5、不要使用過了有效日期的試劑盒;稀釋或攙雜 使用會引起靈敏度、OD 值變化;不要交換使用 不同批號的盒中試劑。

6、不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封;標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 和無色的發(fā)色劑對光敏感,因此要避免直接暴 露在光線下。

7、顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。標(biāo) 準(zhǔn)品 1 的吸光度值小于 0.5 時(shí),表示試劑可能

 

 

 



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